BÀI 6: THỰC HÀNH: TÁCH CHIẾT DNA

1. NGUYÊN LÍ

- DNA tồn tại trong nhân tế bào.

- Phương pháp:

+ Phá vỡ mô → tách rời các tế bào → nghiền mẫu vật → phá hủy thành tế bào → phá hủy màng tế bào, màng nhân → giải phóng dịch nhân tế bào.

+ Loại bỏ các protein → phân tử DNA và RNA.

+ Kết tủa DNA bằng ethanol: các phân tử DNA kết tụ lại → màu trắng đục.

2. CÁCH TIẾN HÀNH

+ Bước 1: Nghiền nhỏ mẫu vật trong cối hoặc máy xay, thêm nước lạnh và khuấy đều. Ép lấy nước dứa và đổ vào ống nghiệm.

+ Bước 2: Lọc bỏ phần cặn, chỉ lấy dịch nước trong.

+ Bước 3: Cho dịch lọc vào trong một ống nghiệm khác và cho 30 mL dung dịch nước rửa bát pha loãng vào dịch lọc, khuấy đều, để yên 5 - 10 phút.

+ Bước 4: Rót hỗn hợp dịch gan gà và nước rửa bát sang ống nghiệm mới (1/3 - 1/2 ống nghiệm); bổ sung 5 mL nước dứa tươi, khuấy nhẹ, để yên 10 phút.

+ Bước 5: Rót từ từ cồn ethanol theo thành ống nghiệm cho đến khi gần đầy → xuất hiện các sợi DNA kết tủa. Dùng tăm tre hoặc đũa thủy tinh để thu DNA.